E' il più antico museo milanese, iniziato nel 1618 dal cardinale Federico Borromeo presso l'Accademia di Belle Arti e la celebre Biblioteca. L'Ambrosiana conserva capolavori delle scuole lombarda, veneta e di altre scuole italiane. Tra le opere principali: un ritratto attribuito al De Predis, "Il musico" attribuito a Leonardo, i cartoni della "Scuola di Atene" di Raffaello, "La canestra di frutti" del Caravaggio e dipinti del Bergognone, Bramantino, Serodine, Moroni, Moretto, Tiziano, Magnasco, Jacopo Bassano, Daniele Crespi, Luini, Botticelli, Ghirlandaio, Pinturicchio, Vivarini. Ospita inoltre preziosi manoscritti come il "Codice Atlantico" di Leonardo e il "Virgilio", codice miniato di Simone Martini, appartenuto a Francesco Petrarca, e sculture preromaniche e romaniche, oreficerie, bronzi, strumenti scientifici.
La pinacoteca resta chiusa nei giorni 1 gennaio, il giorno di Pasqua, il 1 maggio ed il 25 dicembre.
I 250 anni dell'Accademia di Belle Arti di Brera e i 100 anni degli Amici raccontati in tre mostre: Cento anni per Brera, Hayez. Il pittore di Brera e I Maestri di Brera, dal 7 ottobre 2026 tra Pinacoteca e Palazzo Citterio a Milano.
Il 7 luglio 2026 Liu Bolin ha donato alla Pinacoteca di Brera due fotografie della serie A message for beauty, che documentano la sua performance mimetizzata davanti all'Ultima Cena di Leonardo e nella basilica di Santa Maria delle Grazie a Milano.
Per Body Machine (Meridians), in mostra al ledwall di Palazzo Citterio dal 23 aprile al 14 luglio 2026, Sougwen Chung ha trasformato un'immersione tra i ghiacci e dati del corpo in un'installazione di luce, suono e movimento. Ingresso gratuito.